Uma enzima é uma proteína que catalisa (aumenta a taxa de) reações químicas. A temperatura ideal da maioria das enzimas, ou a temperatura na qual as enzimas melhoram as reações, está entre 35 e 40 graus Celsius. O aumento da temperatura dentro desta janela aumenta a taxa de reação, porque excita moléculas e aumenta a taxa na qual enzimas / reagentes colidem e reagem para produzir o produto. No entanto, o aumento excessivo da temperatura pode desnaturar a enzima e impedir que ela funcione.
Determine a temperatura ideal da enzima, aquecendo a reação em quantidades infinitesmais e colhendo pequenas amostras da reação, para determinar quando a taxa máxima de produção do produto ocorre.
Selecione um método Determine como você medirá a concentração do seu produto em vários pontos do experimento. Por exemplo, você pode medir a concentração de muitos produtos usando um espectrofotômetro e calculando a concentração a partir da absorvância ou medindo a fluorescência e calculando a concentração a partir da fluorescência.
Configure sua experiência. Coloque seus reagentes e enzimas em um pequeno recipiente com uma tampa, como um frasco de cintilação. A reação começará. Coloque o frasco de cintilação em um copo maior de água à temperatura ambiente. Coloque o copo em uma placa de aquecimento. Coloque um termômetro dentro do copo. Isso permite medir a temperatura da reação em vários pontos.
Colete uma amostra de 100 microlitros da reação em temperatura ambiente, cerca de 25 graus Celsius. Ligue a placa de aquecimento. A várias temperaturas entre 30 e 40 graus Celsius (30,5, 31, 31,5, etc.), colete amostras de 100 microlitros de sua reação.
Determine a concentração do seu produto a cada temperatura. Quando a temperatura subir acima de 40 graus Celsius, você verá uma diminuição na taxa na qual o substrato é convertido em produto, porque a enzima é desnaturada. O ponto em que o produto está sendo produzido na taxa máxima é o ponto em que a temperatura está ótima.