Como calcular o Km

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Autor: Monica Porter
Data De Criação: 20 Marchar 2021
Data De Atualização: 18 Novembro 2024
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Nas reações biológicas, as enzimas funcionam como catalisadores, fornecendo caminhos alternativos para que as reações ocorram e acelerando o processo geral. Uma enzima trabalha dentro de um substrato, e sua capacidade de aumentar a velocidade da reação depende de quão bem ela se liga ao substrato. A constante de Michaelis, denotada por KM, é uma medida de afinidade enzimática / substrato. Um valor menor indica uma ligação mais estreita, o que significa que a reação atingirá sua velocidade máxima em uma concentração mais baixa. KM tem as mesmas unidades que a concentração de substrato e é igual à concentração de substrato quando a velocidade da reação está na metade do seu valor máximo.

O enredo de Michaelis-Menten

A velocidade de uma reação catalisada por enzima é uma função da concentração do substrato. Para derivar um gráfico para uma reação específica, os pesquisadores preparam várias amostras de substrato em diferentes concentrações e registram a taxa de formação do produto para cada amostra. Um gráfico de velocidade (V) versus concentração () produz uma curva que sobe rapidamente e se estabiliza na velocidade máxima, que é o ponto no qual a enzima está trabalhando o mais rápido possível. Isso é chamado de plotagem de saturação ou plotagem de Michaelis-Menten.

A equação que define o gráfico de Michaelis-Menten é:

V = (Vmax ) ÷ (KM +, essa equação se reduz a V = Vmax ÷ 2, então KM é igual à concentração do substrato quando a velocidade é metade do seu valor máximo. Teoricamente, é possível ler KM fora do gráfico.

O enredo de Tecelão de linha-Burk

Embora seja possível ler KM de uma trama de Michaelis-Menten, não é fácil ou necessariamente preciso. Uma alternativa é traçar o recíproco da equação de Michaelis-Menten, que é (depois que todos os termos foram reorganizados):

1 / V = ​​{KM/ (Vmax ×)} + (1 / Vmax)

Essa equação tem a forma y = mx + b, onde

Esta é a equação que os bioquímicos normalmente usam para determinar KM. Eles preparam várias concentrações de substrato (porque é uma linha reta, eles tecnicamente precisam de apenas dois), plotam os resultados e leem KM diretamente fora do gráfico.