Como é o caso ao usar qualquer instrumento científico, é necessário garantir que o instrumento esteja em boas condições de funcionamento antes de usá-lo para analisar uma amostra. A verificação da resposta do instrumento para uma amostra conhecida verifica se o instrumento está calibrado corretamente. Os espectrofotômetros requerem calibração periódica para garantir a resposta correta do instrumento. Os espectrofotômetros de infravermelho (IR) usam poliestireno como padrão de calibração. Uma varredura do instrumento com um pedaço de poliestireno no suporte da amostra verificará a presença de picos observados nos espectros de IV e a intensidade relativa dos picos.
Ligue o espectrofotômetro e deixe aquecer por pelo menos 10 minutos. O tempo de aquecimento é necessário para a fonte estabilizar. Sem uma fonte estável, você não pode confiar nos espectros obtidos. O sinal analítico depende da atenuação da fonte de radiação pela amostra.
Execute o padrão de calibração colocando um pedaço de filme de poliestireno no suporte da amostra. Sem uma execução de teste usando uma amostra de espectros conhecidos chamada padrão, você não tem certeza de que o espectrofotômetro está funcionando corretamente.
Recupere os espectros para a amostra de poliestireno. Compare os espectros com o de uma referência padrão dos espectros de infravermelho. Verifique se todos os picos esperados existem nos espectros de teste. A localização dos picos deve estar alinhada com o comprimento de onda da absorção.
Verifique os espectros para garantir que a força do sinal esteja dentro de 95% do máximo para o pico mais forte. Se o pico mais forte dos espectros for maior ou menor que a escala completa, ajuste a atenuação para fornecer a força correta do sinal.
Calibre o espectrofotômetro infravermelho com freqüência. Uma frequência mínima de calibração deve incluir uma verificação logo antes e outra logo após o trabalho durante o dia.