Como calcular a eficiência catalítica

Contente

• Noções básicas de enzimas
• Cinética enzimática
• Constantes de taxa
• Michaelis Constant e eficiência enzimática

As enzimas são proteínas em sistemas biológicos que ajudam a acelerar as reações que, de outra forma, ocorreriam muito mais lentamente do que sem o auxílio da enzima. Como tal, eles são um tipo de catalisador. Outros catalisadores não biológicos desempenham um papel na indústria e em outros lugares (por exemplo, catalisadores químicos auxiliam na combustão da gasolina para melhorar as capacidades dos motores a gás). As enzimas, no entanto, são únicas em seu mecanismo de ação catalítica. Eles trabalham diminuindo a energia de ativação de uma reação sem alterar os estados de energia dos reagentes (as entradas de uma reação química) ou os produtos (as saídas). Em vez disso, eles na verdade criam um caminho mais suave entre reagentes e produtos, diminuindo a quantidade de energia que precisa ser "investida" para receber um "retorno" na forma de produtos.

Dado o papel das enzimas e o fato de muitas dessas proteínas de ocorrência natural terem sido cooptadas para uso terapêutico humano (um exemplo é a lactase, a enzima que auxilia na digestão do açúcar do leite que milhões de pessoas não conseguem produzir), não é de surpreender que os biólogos tenham apresentado ferramentas formais para avaliar quão bem enzimas específicas realizam seus trabalhos sob condições conhecidas e determinadas - isto é, determinar sua eficiência catalítica.

Noções básicas de enzimas

Um atributo importante das enzimas é sua especificidade. As enzimas, de um modo geral, servem para catalisar apenas uma das centenas de reações metabólicas bioquímicas que ocorrem sempre no corpo humano. Assim, uma dada enzima pode ser pensada como uma fechadura, e o composto específico sobre o qual atua, chamado substrato, pode ser comparado a uma chave. A parte da enzima com a qual um substrato interage é conhecida como o local ativo da enzima.

As enzimas, como todas as proteínas, consistem em longas cadeias de aminoácidos, dos quais existem cerca de 20 nos sistemas humanos. Os locais ativos das enzimas geralmente consistem em resíduos de aminoácidos ou pedaços quimicamente incompletos de um determinado aminoácido, que podem estar "ausentes" de um próton ou outro átomo e, como resultado, carregam uma carga elétrica líquida.

As enzimas, criticamente, não são alteradas nas reações que catalisam - pelo menos não após o término da reação. Mas eles sofrem mudanças temporárias durante a própria reação, uma função necessária para permitir que a reação em questão continue. Para levar adiante a analogia de bloqueio e chave, quando um substrato "encontra" a enzima necessária para uma determinada reação e se liga ao local ativo das enzimas (a "inserção da chave"), o complexo enzima-substrato sofre alterações ("giro da chave" ") que resultam na liberação de um produto recém-formado.

Cinética enzimática

A interação do substrato, enzima e produto em uma determinada reação pode ser representada da seguinte maneira:

E + S ⇌ ES → E + P

Aqui, E representa a enzima, S é o substrato e P é o produto. Portanto, você pode imaginar o processo como algo parecido com um pedaço de argila de modelagem (S) tornando-se uma tigela totalmente formada (P) sob a influência de um artesão humano (E) As mãos dos artesãos podem ser consideradas o local ativo da "enzima" que essa pessoa incorpora. Quando o barro fixo fica "ligado" às mãos das pessoas, eles formam um "complexo" por um tempo, durante o qual o barro é moldado em uma forma diferente e predeterminada pela ação da mão à qual está ligado (ES) Em seguida, quando a tigela estiver totalmente modelada e não for necessário mais trabalho, as mãos (E) solte a tigela (P) e o processo está concluído.

Agora considere as setas no diagrama acima. Você notará que o passo entre E + S e ES tem setas se movendo em ambas as direções, implicando que, assim como enzima e substrato podem se unir para formar um complexo enzima-substrato, esse complexo pode se dissociar na outra direção para liberar a enzima e seu substrato em suas formas originais.

A seta unidirecional entre ES e P, por outro lado, mostra que o produto P nunca se une espontaneamente à enzima responsável por sua criação. Isso faz sentido à luz da especificidade observada anteriormente das enzimas: se uma enzima se liga a um determinado substrato, ela também não se liga ao produto resultante ou então essa enzima seria específica para dois substratos e, portanto, não é específica. Além disso, do ponto de vista do senso comum, não faria sentido que uma determinada enzima fizesse uma determinada reação funcionar mais favoravelmente ambos instruções; isso seria como um carro que rola com subidas e descidas com a mesma facilidade.

Constantes de taxa

Pense na reação geral na seção anterior como a soma de três reações concorrentes diferentes, que são:

1) ; E + S → ES 2) ; ES → E + S 3) ; ES → E + P

Cada uma dessas reações individuais tem sua própria taxa constante, uma medida da rapidez com que determinada reação ocorre. Essas constantes são específicas para reações particulares e foram experimentalmente determinadas e verificadas para uma infinidade de diferentes grupos de substrato mais enzima e complexo enzima-substrato mais produto. Eles podem ser escritos de várias maneiras, mas geralmente, a taxa constante para a reação 1) acima é expressa como k₁, o de 2) como k_-1e o de 3) como k₂ (isso às vezes é escrito k_gato).

Michaelis Constant e eficiência enzimática

Sem mergulhar no cálculo necessário para derivar algumas das equações a seguir, você provavelmente pode ver que a velocidade na qual o produto se acumula, v, é uma função da taxa constante para esta reação, k₂e a concentração de ES presente, expresso como. Quanto maior a constante de taxa e mais complexo substrato-enzima presente, mais rapidamente o produto final da reação se acumula. Portanto:

v = k_2

No entanto, lembre-se de que outras duas reações além da que cria o produto P estão ocorrendo ao mesmo tempo. Uma delas é a formação de ES de seus componentes E e S, enquanto o outro é a mesma reação ao contrário. Reunindo todas essas informações e entendendo que a taxa de formação de ES deve ser igual à sua taxa de desaparecimento (por dois processos opostos), você tem

k_1 = k_2 + k _ {- 1}

Dividindo os dois termos por k₁ rendimentos

= {(k_2 + k _ {- 1}) acima {1pt} k_1}

Como todos os "k"os termos nesta equação são constantes, eles podem ser combinados em uma única constante, K_M:

K_M = {(k_2 + k _ {- 1}) acima {1pt} k_1}

Isso permite que a equação acima seja escrita

= K_M

K_M é conhecido como a constante Michaelis. Isso pode ser considerado como uma medida da rapidez com que o complexo enzima-substrato desaparece por meio da combinação de tornar-se não ligado e formar um novo produto.

Voltando à equação da velocidade de formação do produto, v = k₂, a substituição fornece:

v = Bigg ({k_2 acima {1pt} K_M} Bigg)

A expressão entre parênteses, k₂/K_M, é conhecida como constante de especificidade _, _ também chamada de eficiência cinética. Depois de toda essa álgebra traquina, você finalmente tem uma expressão que avalia a eficiência catalítica, ou eficiência enzimática, de uma determinada reação. Você pode calcular a constante diretamente da concentração da enzima, da concentração do substrato e da velocidade da formação do produto, reorganizando para:

Bigg ({k_2 above {1pt} K_M} Bigg) = {v above {1pt}}