Contente
- Melhor visualização
- Identificação e Classificação
- Detecção de Viabilidade
- Identificação de estruturas celulares
Os microbiologistas estudam as características de microrganismos como algas, protozoários, bactérias, fungos e vírus usando um microscópio. Embora alguns organismos, como protozoários e células de levedura, sejam fáceis de observar usando uma montagem úmida, as células bacterianas requerem coloração. Os cientistas desenvolveram vários métodos, como coloração de Gram, coloração rápida com ácido e coloração fluorescente para melhor visualização de células bacterianas e estruturas celulares. Usando esses métodos de coloração, é possível identificar características estruturais que ajudam a classificar as bactérias.
Melhor visualização
Os organismos bacterianos são tão pequenos que a maioria deles é visível apenas sob um microscópio com um poder de ampliação de 1000X. No entanto, a mera ampliação de tamanho não fornece um grau suficiente de clareza, de modo que as bactérias devem ser manchadas antes da observação para fornecer a clareza necessária para a visualização.
Identificação e Classificação
A coloração de bactérias para distinguir entre tipos bacterianos é conhecida como coloração diferencial. A coloração de Gram é uma dessas manchas diferenciais que distingue as bactérias com base no seu conteúdo na parede celular. Nesse método, as células bacterianas reagem com uma mancha violeta de cristal para adquirir uma cor violeta. Ao adicionar um agente de remoção de manchas, algumas células bacterianas perdem a cor, enquanto outras não. Ao adicionar a mancha de safranina, as células descoloridas ficam com a mancha vermelha, enquanto as células bacterianas que não perderam a cor permanecem violetas. As células bacterianas que absorvem a cor vermelha são chamadas organismos Gram-negativos e aquelas que não absorvem a cor são classificadas como organismos Gram-positivos. A coloração de Gram fornece um método rápido para a identificação inicial de bactérias envolvidas em infecções. Da mesma forma, o procedimento de coloração ácido-rápido ajuda a identificar especificamente os organismos pertencentes à classe de bactérias denominadas Micobactérias, como Mycobacterium tuberculosis.
Detecção de Viabilidade
Em amostras de cultura bacteriana, geralmente é importante detectar a presença de células bacterianas vivas. Métodos de coloração, como a coloração fluorescente, ajudam a identificar se as células de cultura são viáveis ou não. As bactérias vivas têm a capacidade de converter a mancha de cloreto de 5-ciano-2,3-ditolil-tetrazólio (CTC) em um corante que mostra uma fluorescência vermelha. Portanto, quando as culturas coradas com CTC emitem essa fluorescência, isso indica a presença de bactérias viáveis. O iodeto de propídio é uma mancha que atua apenas em células não-vivas que possuem membranas danificadas e, portanto, é útil na identificação de células bacterianas mortas.
Identificação de estruturas celulares
A coloração fornece um método para visualizar claramente várias estruturas celulares. Por exemplo, o método de coloração Fuelgen permite a identificação do núcleo nas células bacterianas, enquanto a coloração de Albert é útil na visualização de grânulos metacromáticos. Da mesma forma, a técnica de impregnação com prata permite a identificação de espiroquetas. Os flagelos são fáceis de observar quando manchados com a mancha de Ryu. A coloração verde malaquita ajuda a identificar os esporos bacterianos.